出厂水日检九项操作演示图丨总大肠菌群检测操作图示

（该演示图可张贴于水厂化验室，供化验人员学习使用）

操作步骤：

A：一次性制备用于10次检测的培养基

1、将水煮沸10分钟后冷却，制备灭菌水；

2、备好培养基称量装置。该装置为配有内置药匙和颜色瓶盖的小塑料管。使用内置药匙向塑料管中加入10满匙的粉末培养基；

3、向培养基称量装置中倒入冷却后的灭菌水至瓶口处；

4、盖上蓝色瓶盖，然后震荡使粉末培养基完全溶解；

5、溶解后的培养基应呈现亮粉红色；

6、将培养基称量装置置于121℃条件下灭菌至少10分钟。注意不可以将塑料管直接放入高压灭菌锅的底部。

B：灭菌消毒膜过滤装置

1、取一支套件提供的塑料吸管，吸取一毫升甲醇加入的取样杯中，旋转杯体使其表面尽可能全部被甲醇覆盖；

2、将过滤漏斗推入蓝色橡胶底座中，漏出灭菌标记；

3、握住取样杯，杯口面向自己并远离，用打火机点燃内部的甲醇；

4、当火焰全部熄灭后，将过滤漏斗翻转过来并将取样杯插入；

5、等待十五分钟，确保甲醛气体能够进行彻底的消毒，然后丢弃任何液体残留；

、使用前请用样品水对已灭菌的取样杯进行润洗。

C：准备铝制培养皿和吸收垫

1、打开吸收垫包装瓶的盖子，并将包装瓶与膜垫分配器连接；

2、打开已灭菌的铝制培养皿的盖子，注意操作时只可拿去培养皿的边缘部分；

3、膜垫分配器配有一个刻有沟槽的滑杆，用拇指向后滑动滑杆，可将一片吸收垫推入到培养皿中；

4、取装有液体培养基的培养基称量装置，小心地将培养基倒在培养皿中的吸收垫上；

5、确保吸收垫完全吸收饱和，并在边缘留有少量多余的培养基；

6、将培养皿的盖子盖上，确保培养基保持无菌状态并避免污染。

D：膜过滤水样

1、将过滤漏斗从橡胶基座上取下，倒置在清洁的工作台面上；

2、将镊子在打火机的火焰中来回翻面移动进行灭菌，并冷却；

3、取一片滤膜并撕下外面的透明包装，用灭菌镊子将膜外侧蓝色背纸揭开，将印有网格的白色滤膜取出；

4、将滤膜直接放在钢制过滤器支架上，确保印有网格一面向上；

5、将过滤漏斗向下插入蓝色橡胶基座中到底，使滤膜被牢牢固定在原位。确认过滤漏斗正确处于“过滤”位置；

6、将水样倒入过滤漏斗中至一百毫升刻度线。将手动真空泵与过滤装置连接，并将水从过滤器中泵出；

7、当所有水全部过滤后，断开真空泵连接，将过滤漏斗从橡胶基座上取下，用灭菌镊子将滤膜小心取出后，放在培养皿中已经饱和的培养基吸收垫上，注意有网格一面向上；

8、将培养皿盖好并做好标记。将培养皿全部放入支架中后，即可开始培养。

E：进行菌落计数并记录结果

1、培养结束后，将培养皿从培养箱中取出，记录该样品的培养温度和培养时长；

2、将培养皿置于水平台面上，注意尽量选择自然光条件，避免日光直射；

3、打开培养皿。计数滤膜上所有直径大于1毫米的黄色菌落的数量，如有必要可使用手持放大镜；

4、注意所有无色、红色或任何其他颜色的菌落都不应计数在内；

5、当菌落数量比较大时，可使用滤膜表面的网络对计数过程进行简化，如可依次对每一列网格里的菌落进行系统计数；

6、最终计数结果以每容积水样中含菌落个数来计，通常使用的单位为每100毫升含菌落数多少。